1.培养基种类及成分

培养基根据其物理性状大致分成两类，即固体和液体培养基。在培养基中加入一定量的凝固剂(如琼脂、明胶等)即为固体培养基，而不加入凝固剂的即为液体培养基，具体运用上应视培养目的要求不同分别选择采用。

基本培养基因花卉种类不同而有多种，如MS、ER(茶花)、AR(杜鹃)、KYOTO(洋兰)等，其中以MS基本培养基应用最为广泛。现以MS为例，说明母液的组分和配制，MS基本培养基所有19种药品大体可分为大量元素、铁盐、微量元素及维生素四大类。大量元素中又依据混合后是否发生化学沉淀而分成4组配制。

2.母液配制与保存

由于培养不同植物，需要配制不同的培养基。为了减少工作量，可先把药品配成母液(即浓缩液)，一般扩大10～100倍，其中大量元素倍数略低，一般为10～20倍，微量元素和有机成分及铁盐等可扩大50～100倍。母液的配制及保存应注意以下几个方面：

①药品称量应精确，尤其微量元素化合物应精确至0.0001g，大量元素化合物可精确至0.01g。

②配铁盐时应先溶EDTA钠盐，再用该溶液去溶解硫酸亚铁，以免发生氧化。

③配制母液的浓度适当，倍数不宜过大，一是长时间保存后易沉淀，二是浓度大，用量就少，在配制培养基时易影响精确度。

④母液应在2～4°C的冰箱内保存，贮藏也不宜过长，一般几个月左右，在配好的母液容器上应注明配制日期，以便定期检查，如出现浑浊、沉淀及霉菌等现象，就不能使用。

3.培养基的配制

首先要根据培养基配方，算好母液吸取量，并按顺序吸取，然后加入激素与蔗糖溶液，并加入蒸馏水定容至所需体积，加入琼脂加热溶化，并用0.1～1mol/L的盐酸或氢氧化钠调整pH值至5.8.配制好的培养基要趁热分注，倒入试管、三角瓶等培养器皿中，一般至容器1/4〜1/5左右，最后加塞或封口准备消毒。

4.培养基的消毒

(1)高压灭菌锅消毒注意容器不能装得过满，以免影响锅内蒸汽循环。待水煮沸后，放气3～5min排出锅内冷空气，即可关上放气阀并继续加热，使锅内保持1.1kg/cm2压力下、温度120°C左右，大约15～20min即可。

(2)过滤消毒一些易受高温破坏的培养基成分如吲哚乙酸(IAA)吲哚丁酸(IBA)、玉米素(ZT)等，不宜用高温高压法消毒，则可用过滤消毒后加入至髙温高压消毒的培养基中，过滤消毒可用细菌过滤消毒器，通过其中的0.45um孔径的滤膜将直径较大的细菌等滤去，过滤消毒应在无菌室或超净工作台上进行，以避免污染培养基。